"Die Mistel in der Tumortherapie - Grundlagenforschung und Klinik"
"Mistletoe in Tumor Therapy - Basic Research and Clinical Practice"
Das Mistellektin I (ML I): Bindung, Aufnahme und Einfluss auf die Zytokinexpression - Untersuchungen an humanen peripheren Blutlymphozyten und CD4-Subpopulationen
The Mistletoe Lectin I (ML I): Binding, Uptake and Influence on the Expression of Cytokines - Investigations on Human Lymphocytes from Peripheral Blood and CD4-Subpopulations
Mistelextrakte werden in der adjuvanten Tumortherapie eingesetzt. Als ein mutmaßlicher Wirkstoff gilt das Mistellektin I (ML I). Es besitzt immunmodulierende Eigenschaften, deren Mechanismen erst anfänglich geklärt sind. Von besonderem Interesse in dieser Arbeit war der Einfluss von ML I auf die in vitro Zytokinexpression von Lymphozyten. Nach Inkubation verschiedener isolierter Zellfraktionen mit ML I oder Iscador M wurden intrazellulär die Zytokine IFN-g und IL-4 fluoreszenzgefärbt und die Zellen durchflusszytometrisch analysiert. Es wurde keine intrazelluläre Zytokinexpression nachgewiesen. Bei zusätzlichen Stimulationen mit PMA konnte gezeigt werden, dass ML I einerseits die PMA-induzierte Expression von IFN-g hemmt und auf der anderen Seite die PMA-induzierte Expression von IL-4 leicht verstärkt. Diese Befunde bieten Anhaltspunkte für weitere Erkenntnisse über die Signalwege, anhand derer ML I auf immunkompetente Zellen wirkt. Konfokalmikroskopische Aufnahmen zeigen, dass ML I-Moleküle an CD4+-Zellen binden und von ihnen innerhalb von 15 min in Form intrazellulärer Vesikel aufgenommen werden. Weiterhin fanden sich Hinweise, dass Moleküle der Zell-Zell-Interaktion zu den Liganden des ML I gehören.
Schlüsselwörter: Mistellektin I, Lymphozyten, Zytokinexpression
Extracts from mistletoe are widely used in adjuvant cancer therapy. Mistletoe lectin I (ML I) is one of the main components with immunmodulating activities, but most of the cellular mechanisms are still unknown. We investigated the influence of ML I on the in vitro expression of cytokines in human lymphocytes. Different cell populations were isolated from peripheral blood and incubated with ML I or Iscador M. By using immunofluorescent staining no intracellular expression of IFN-g or IL-4 was detected. Additional stimulation of ML I-cultured cell with PMA showed that ML I inhibits the PMA-induced expression of IFN-g whereas the PMA-induced expression of IL-4 was slightly activated by ML I. These results can lead to further information about signal transduction pathways induced by ML I in immune competent cells. By confocal laser microscopy we found that ML I molecules were associated to the surface of CD4+ cells and were enclosed in intracellular vesicles after 15 minutes of incubation. Besides, our results indicate that cell adhesion molecules are candidates for ligands of ML I.
Keywords: Mistletoe lectin I, lymphocytes, expression of cytokines